該技術是基于熱力學和流體動力學第一定律,利用分析超速離心機研究蛋白、核酸和聚合物及其他各種復合物在溶液狀態下的行為。
關鍵詞:分析超速離心技術;沉降速率;沉降平衡;分子生物學
分析超速離心技術是表征離心力場中溶液狀態下大分子行為的一種行之有效的方法。該技術基于兩種實驗模式,一種是濃度分布隨時間實時改變(即沉降速率,SV),另一種是在相對低的離心力場中,沉降和擴散兩種力最終達到平衡而形成穩定的濃度分布(即沉降平衡,SE)。這兩種實驗都是利用相同的儀器———分析超速離心機。
瑞典科學家Theodor Svedberg 于1925年發明分析超速離心技術,并于第2年制造出世界上第一臺新型超速離心機,并引入紫外-可見光檢測系統實時監測沉降過程,首次測量了一些蛋白質的相對分子質量。結合數據分析方法,能夠確定樣本純度,表征生物分子復合物的組裝和分解機制,確定亞單位的化學計量,檢測和表征大分子的構象變化,并測定平衡常數和熱力學參數。